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摘 要:介绍了大肠菌群概念和水质检测中相关检测项目和检测方法,并比较了用多管发酵法和固定底物酶底物法检测水源水中的耐热大肠菌群,结果表明两种方法无差异.固定底物酶底物法可以作为准确的检测方法推广.
关键词:大肠菌群 水质检测 多管发酵法 酶底物法
中图分类号:X832 文献标识码:A 文章编号:1672-3791(2013)07(c)-0129-01
由于我国饮用水的水源水大部分都取自城市生活污水直接排放的江河湖泊,所以近年来我国的水质标准对于微生物特别是对于大肠菌群的标准要求越来越严格.GB5749-2006《生活饮用水卫生标准》中大肠菌群增加了大肠埃希氏菌﹑耐热大肠菌群,修订了总大肠菌群.
1. 水质检测中大肠菌群的相关检测项目
总大肠菌群,37 ℃培养24 h内能够发酵乳糖产酸产气及乙醛.主要包括埃希氏菌属(Escherichia)、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属.此名称并非细菌学分类,而是卫生领域用语,是指具有某些特性的一组与粪便相关的细菌[1].耐热大肠菌群,44.5 ℃具有与大肠菌群相同发酵及生物化学性能的菌群,包括埃希氏菌和耐热克雷伯菌属.此名称也是卫生领域用语.大肠埃希氏菌,好氧革兰氏阴性短杆菌,无芽孢,大小约0.5～0.8×2.0～3.0 μm,能分解乳糖产酸产气,直接指示粪便污染.
2. 水质检测中大肠菌群的相关检测方法
大肠菌群的标准检验方法有多管发酵法,滤膜法,固定底物酶底物法.有文献报道[2]还可以采用PCR技术、免疫学等方法,但这些方法虽灵敏度高,但检测成本较高很难广泛应用.滤膜法是过滤水样将细菌截留在0.45 μm的过滤膜膜上然后在选择性培养基中培养24 h,计数膜上生长出的典型细菌菌落.但此方法适用于较大体积水样,结果易受其它细菌的影响.所以一般情况下我们主要采用多管发酵法和固定底物酶底物法.
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2.1 多管发酵法和固定底物酶底物法的比较
我们以耐热大肠菌群检测为例.
2.2.1 原理
多管发酵法采用耐热大肠菌群能使乳糖发酵,在44.5 ℃条件下培养24 h生长产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌.固定底物技术酶底物法(Defined Substrate Technology)采用耐热大肠菌群细菌能产生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)分解ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galac论文范文yranoside)使培养液呈论文范文,来判断水样中是否含有耐热大肠菌群[1].
2.2.2 材料与设备
试剂:MMO-MUG(Minimum Media ONPG-MUG)培养基—Colilert试剂,多管发酵法的试剂按照《生活饮用水卫生标准 生活用水标准检验方法》(GB5750-2006)中规定的配制.设备:定量程控封口机.
2.2.3 试验方法
多管发酵法检测耐热大肠菌群方法参见《生活饮用水卫生标准 生活用水标准检验方法》(GB5750-2006).酶底物法用无菌稀释瓶分别量取100 ml水样及阳性对照物,加入Colilert试剂,混摇均匀使之完全溶解并倒入97孔定量盘内,用定量封口机封口,放入44.5±0.2 ℃培养箱中培养24 h.24 h后进行结果判读,如结果为可疑阳性,可延长培养时间到28 h进行结果判读,超过28 h之后出现的颜色不作为阳性结果.如果孔穴内水样变成论文范文或比阳性对照物深则表示该孔穴中含有耐热大肠菌群.如无论文范文或颜色浅则表示不含有耐热大肠菌群.计算论文范文反应的孔穴数,对照MPN表查出耐热大肠菌群的最大可能数,结果以MPN/100 ml表示.如果所有孔未产生论文范文,则可报告耐热大肠菌群未检出.数据统计方法使用Excel软件及SPSS统计.
2.2.4 试验结果
在本项试验中采用35份水源水进行耐热大肠菌群的检测结果如图1所示.
3. 讨论
对于两种方法检测耐热大肠菌群结果进行配对t检验,t等于1.882,P等于0.068,表明两种结果具有显著相关性,在统计学上没有差异.通过分析上述的试验结果,笔者认为多管发酵法操作时间需48～72 h,步骤繁琐,且需要进一步进行验证试验,不能对卫生状况快速评价,但成本低,适用于大多数实验室.而酶底物法操作时间为24 h,灵敏度高,过程简便,可用于快速检测,值得推广.
参考文献
[1] 丁程成.欧美水质大肠菌群相关检验标准探究[J].环境科技,2010(1):67-69.
[2] ISO17994:Water quality-Criteria for establishing equivalence between microbilogical methods[J].First edition,2004.
总结：本论文主要论述了发酵检测论文范文相关的参考文献,对您的论文写作有参考作用。
发酵液成分检测引用文献:
[1] 发酵饮料成分检测论文
[2] 设计霍尔式液位检测系统论文
[3] 纺织品成分检测毕业论文
