《大连地区松材线虫病感病树体内松材线虫分布规律》
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摘 要：松材线虫病发生后,松材线虫各龄虫体在感病树体内不断运动、繁殖、扩散的过程伴随着树势衰弱直至死亡,研究感病树体内松材线虫的分布规律,对于分析掌握松材线虫病的为害过程,提高疫病防控效率具有重要的参考价值.
关键词：大连;松材线虫;感病树体;分布规律
一、研究背景
2016年10月,大连市沙河口区大顶山发现松材线虫病危害情况,该疫情在辽宁省属于首次发生,大连自此成为我国发生松材线虫病的最北区域.松材线虫病的易感染树种黑松、赤松都是我市主要森林树种,疫情的发生严重威胁我市森林安全.鉴于松材线虫病的严重危害性,该疫情引起辽宁省政府和大连市政府的高度重视,立即组织各相关部门开展松材线虫病防治工作.2017年6月大连市财政局下发文件,《大连地区松材线虫病发病规律及防治措施研究》正式立项.自此,项目组依托南京林业大学、东北林业大学相关研究的技术支撑,同时从松材线虫的形态学鉴定、分子检测、感病树体线虫分布、媒介昆虫等多个方向开展研究,探索符合本地实际疫情规律的松材线虫病防治措施.
二、研究方法
从我市松材线虫病典型感病林分中,选取感病样木;将样木伐倒,自树干部分等距截取圆盘,自树冠部分四个方向侧枝截取木段;将圆盘和木段制成木屑样本,再经贝尔曼漏斗法获取含有线虫的水样;在解剖镜下查数定量水样中线虫数量,通过换算得到标准木横向、纵向等各部位线虫分布数量,据此分析总结分布规律.
1.外业调查
从中山区和沙河口区四处典型感病林分中,选取隔年枯死木、当年发病初期枯死木和当年发病晚期枯死木三种类型黑松疫木标准木共计11株,共截取树干圆盘91个、侧枝及枝梢木段143个,共制得木屑样本900个.
（1）将感病黑松样木伐倒,按立木朝向在树皮上标注南北方向,将伐倒木编号;自地面伐根0m处至树梢,按2m长度等距截取圆盘,圆盘厚度2cm左右;伐根处圆盘编为0号,伐根向树梢方向圆盘依次编号,并在截取的圆盘上标记东南西北方向.
（2）截至上部树冠部分主干较细处,取东南西北四个方向侧枝,每个方向侧枝取基部、中部、梢部三段,在每段上分别标注朝向和部位.
2.内业检测
用外业所采圆盘和木段等样本,制取木屑样品,按照贝尔曼漏斗法进行分离,获得含线虫的水样,用于镜检计数.
（1）木屑样本制取：在直径大于10cm的圆盘上取圆心及东南西北四个方向内外共9个样品,小于10cm的圆盘上取圆心及东西南本四个方向共5个样品,侧枝每个木段制取1个样品.将所取样品剪碎成木屑状,每份木屑样品统一保留8g.
（2）线虫水样制取：按照贝尔曼漏斗法要求操作,每份8g木屑样品均用80ml纯水浸泡,静置6～24小时后,留取漏斗下方2ml指形管中线虫提取液,即得8g木屑所含线虫的溶液2ml.
（3）样本镜检计数：将线虫水样摇匀,从上、中、下部位分别移取20μl,在解剖镜下检视计数;将三次样品所得线虫数取平均值,作为20μl溶液中的线虫数量,再据此换算出2ml最初样品溶液中线虫的总数量.
三、研究结论
1.研究结果
（1）所调查的11株样木中各部位松材线虫的数量显示：横向数量心材部分线虫分布最少,中材部分线虫分布最多,边材部分居中;纵向数量树冠上部及侧枝上线虫分布最多.具体数据见图表1.
（2）在树干内各方向的松材线虫数量分布以南面最多,北面最少.南>东>西>北.具体数据见图表2.
2.结论分析
（1）松材线虫在各样木高度上的数量分布,从地径到树梢方向数量是由低到高分布.在树木发病初期,在针叶变色刚开始褪绿时,树体内松材线虫含量不多,在針叶开始发黄后,松材线虫量大量存在.在感病初期是不均匀分布,树体内松材线虫数量很少,随着树木枯死时间加长,松材线虫在树体内的数量急骤增多,分布也变得均匀.
（2）人工接种试验中,在2018年6月13日接种后,在10株接种树的胸径树高处,松材线虫数量的动态变化过程,可以看出在接种后的前4～5周,胸高处才有松材线虫出现,说明在松树感染松材线虫后的5周后,才能检测出松材线虫.在接种后的第8～11周,胸高处的松材线虫含量达到高峰值,接种后的第12周后,胸高处松材线虫含量急骤减少,开始向树冠方向迁移.见图表3.
（3）图表4和图表5为林中8月完全枯死的标准木,对这两株树体各高度和部位的松材线虫含量测量及分析,可以看出这个时期松材线虫是向树方向迁移的,这应该是松材线虫本身的生物学特性所决定的,这与媒介昆虫松墨天牛的取食及产卵习性相关,松墨天年喜欢在树冠上部取食,并多在上部产卵繁殖.
（4）在取样时,还分别取了树皮、活针叶、枯针叶、果、枝条顶芽、侧枝、一年生细活枝、一年生细枯枝等,除树皮和针叶外,其它各部分样品均检测出松材线虫.
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