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主题:动物医学 下载地址:论文doc下载 原创作者:原创作者未知 评分:9.0分 更新时间: 2024-02-26

动物医学论文范文

动物医学论文

目录

  1. 第一篇动物医学论文范文参考:无脊椎动物家蚕为材料的医学实验动物替代研究
  2. 第二篇动物医学论文样文:谁之权利?如何利用?
  3. 第三篇动物医学论文范文模板:高分辨率熔解曲线(HRM)技术在动物病毒基因分型中的研究及应用
  4. 第四篇动物医学论文范例:黄芩苷对小鼠金*葡萄球菌性乳腺炎的作用及机制研究
  5. 第五篇动物医学论文范文格式:双源CT灌注成像早期诊断放射性肺损伤的价值及其病理基础

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第一篇动物医学论文范文参考:无脊椎动物家蚕为材料的医学实验动物替代研究

实验动物替代方法,已广泛应用于生命科学研究领域.家蚕是鳞翅目模式昆虫,有着数千年畜牧化养殖历史,且已积累了系统深入的生理学、病理学和毒理学资料.家蚕遗传突变资源的创新及其在基础生命体系、物质代谢、能量代谢和遗传方式上与哺乳类有众多相似性的发现,使家蚕作为中国特色的模式昆虫正逐渐向实验动物模式化发展.然而,如何通过系统地控制实验用家蚕的遗传因素和生长环境,实现家蚕“实验动物化”,如何根据家蚕的生物学特性,优选出替代方法研究类型,是家蚕在成为标准的实验动物过程中所必须突破的瓶颈.另外,家蚕与小鼠等经典哺乳类模式动物相比,在外源化合物代谢动力学方面究竟存在哪些共性和差异,国内外也尚无系统的研究.本研究以家蚕实验动物化的标准建设为目的,总结了家蚕实验动物化的品种选育、饲养管理、设施管理等规范,设计了家蚕标准化饲养微屏障系统,通过肝毒性模式药物对乙酰氨基酚(APAP)处理,系统地比较研究家蚕与哺乳动物体内APAP的急性毒性分级和药代动力学特性,通过代谢组学方法、高通量分析(RNA-Seq)方法调查APAP对家蚕内源性代谢物和基因表达的差异,揭示APAP在体内所产生的生物效应,用试剂盒检测APAP染毒后家蚕催化药物代谢关键酶的活性,并通过生物信息学方法分析比较家蚕与小鼠等哺乳类在这些关键酶进化上的差异及活性位点差异.研究获得的主要结果如下:1.模药APAP对家蚕的急性毒性分级、药代动力学特征能够为医学实验动物替代建立平行数据急性毒性试验结果显示,APAP对家蚕毒性因品种不同而表现出毒性敏感性不同,大造较皓月敏感.APAP处理雌、雄大造品种的LD50分别为2017±,254μg/g和2169±,300μg/g.急性毒性分级为中低级毒性,与哺乳类相似.代谢动力学结果表明,低浓度600μg/g剂量和高浓度3600μg/g剂量APAP在家蚕体内的药动学呈一室开放型模型,消除半衰期(t1/2)分别为1.06h和2.77h,原药达峰时间(tmax)分别为0.50h和1.00h,原药达峰值浓度(Cmax)分别为67.69μg/ml和568.73μg/ml.相对生物利用度(AUC0-t)分别为:222.63 hμg/ml和1976.32 hμg/ml.代谢中间产物有N-乙酰对苯醌亚胺(NAPQI)产生,与哺乳类相比,药物吸收分布、体内代谢中间产物、总体的动力学(PK)相似,能为医学实验动物替代建立平行数据.2.模药APAP在家蚕的体内能产生与哺乳类共同的生物效应代谢组学分析显示,以600μg/g剂量APAP经口给药家蚕8 h后,循环血中差异代谢物在三羧酸循环、糖酵解途径、氨基酸代谢、黑色素生成等途径中,说明APAP在体内所产生的毒性途径主是因为药物代谢过程中产生了氧化应激,影响了体内能量供给、物质转运和信号传导.代谢物差异分析发现,APAP诱导家蚕血淋巴中氨基酸代谢产生差异,推测氨基酸代谢的异常和苹果酸、琥珀酸、延胡索酸等内源代谢物的显著下降相关,也与APAP染毒后产生的氧化应激相关.酪氨酸、多巴、海藻糖的显著升高进一步证实过量的APAP导致了氧化应激的产生,APAP诱导家蚕的胆固醇降低,却使β-羟基β-*戊二酸升高,表明APAP导致家蚕的胆固醇合成途径失衡,甾体激素的原料供给障碍影响机体的激素调节.3.模药APAP在家蚕的体内能产生与哺乳类共同的药理作用和毒性机理RNA-Seq结果分析APAP给药实验组与对照组的差异基因表达显示,在KEGG分析系统中与新陈代谢相关的通路里,大量的差异表达基因富集于三羧酸循环、氧化磷酸化、脂肪酸的氧化、糖酵解和糖异生等高产能环节,从基因表达水平上进一步证明,APAP对家蚕机体的伤害,主要是氧化应激和能量代谢、物质转运、信号传导等途径异常所至,这与哺乳类所产生的肝损伤机理一致.在KEGG分析系统中与有机体系统相关的通路里,大量的差异表达基因富集于心脏肌肉收缩、血管平滑肌收缩和调节肌动蛋白骨架等循环系统的相关通路,以及部分神经元突触基因通路,这些与代谢组学结果一致.推测APAP对家蚕具有与哺乳类相一致的抑制花生四烯酸通路的药理作用.4.家蚕与小鼠的药物代谢关键酶具有共同的活性位点和蛋白质互作机制生物信息分析结果显示,家蚕和小鼠的谷胱甘肽转硫酶家族成员(GSTs)在结构域和功能域方面,大多具有GSTs活性区域以及硫氧还蛋白的折叠模式,家蚕和小鼠的谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLc)蛋白都具有谷胱甘肽合成酶的功能域,谷氨酸半胱氨酸连接酶(GCLM)都具有NADP依赖氧化还原酶功能域,家蚕硫氧还蛋白过氧化物酶家族(TPXs)中Jafrac1基因编码的过氧化物酶蛋白与小鼠的Prdx1和Prdx2基因编码的过氧化物酶具有高度保守的结构,家蚕的预测蛋白LOC733003、LOC101735759、LOC732921分别具有小鼠的Prdx3、Prdx4、Prdx5编码蛋白的保守结构域,家蚕的2个葡萄糖醛酸转移酶成员(UGTs)和小鼠的21个UGTs成员具有共同的尿苷二磷酸-葡萄糖醛酸和尿苷二磷酸-葡萄糖醛酸转移酶保守功能域,家蚕和小鼠的细胞色素P450酶(CYP450)家族成员也具有CYP450保守的结构域和功能域.家蚕和小鼠的药物代谢关键酶的结构与功能域上的保守性,提示两者在主要的解毒过程与作用机理中可能存在共同的特点.5.家蚕中肠是可建立肝毒性模型的经口给药“首关效应”器官根据APAP经口经药家蚕组织中原药APAP、中间产物NAPQI分布特点,催化药物代谢反应的关键酶(GST、GCL、TPX、UGT、CYP450等)的活性变化结果可知,中间产物经中肠后产量明显提高,高剂量APAP可造成中肠的吸收功能障碍.中肠组织中CYP450酶活变化显著,中肠组织中GST、GCL、TPX、UGT酶活本底显著高于脂肪体,且相应代谢酶活性变化较为显著.表明在经口给药途径中,家蚕中肠是药物代谢的“首关效应”器官.在经口给药途径中,家蚕的中肠与脂肪体相比而言,作为外源药物的“首关效应”器官,类比哺乳类解毒器官(肝脏)更为准确.家蚕中肠是更合适的研究哺乳类肝毒性药物毒性机理的靶器官(组织)模型.6. 结论家蚕已具备实验动物化的基本条件,能够建立系统化、标准化的实验动物饲养管理、环境控制操作规范,家蚕与小鼠对肝毒性模式药物APAP的药物代谢动力学具有一致的特征,家蚕催化解毒作用的关键性代谢酶活性变化及作用机制与哺乳类相似.以家蚕为实验动物,建立中肠损伤模型,可以作为哺乳动物肝损伤模型的替代,用于研究哺乳动物的解毒机制和肝损机理.

第二篇动物医学论文样文:谁之权利?如何利用?

医疗事业是人类健康的福祉,动物在医学科研、生产中起着不可或缺的作用.但近年来,随着动物权利运动的发展,人们对医疗领域利用动物的行为是否道德提出了质疑.对动物权利和动物福利的关注让人类重视对动物内在价值的考量,避免陷入强式人类中心主义的风险;但过度强调动物内在价值而完全拒斥其工具价值,也让现实的医学科研、生产实践陷入进退两难的*困境.特别在我国,动物药是传统中医药事业不可分割的重要一部分,动物权利的诉求与动物利用的现实矛盾尤为突出.因此,本文在*视域下对动物医疗应用的相关问题进行反思,探讨现行条件下动物医疗应用的理论基础和实践路径.本文从动物权利概念与发展切入,全面梳理了关于动物权利的哲学观点,分析了人类中心主义与非人类中心主义关于人与动物关系的理论诉求,并剖析了激进动物权利论的理论缺陷和实践困境.本文力图整合人类中心主义动物利用观与非人类中心主义动物权利观,寻求一种能够同时惠及人类中心主义与非人类中心主义目标的理论共识,为医学科学和人类健康事业的可持续发展提供合理的*理论支撑.通过对中国传统文化中的整体生态观、罗尔斯顿的生态中心论以及马克思主义整体生态观这几种理论形态的分析,本文从人与动物的和解、人类本身的和解的角度提出以马克思主义整体生态观构建动物医疗应用的*基础,并从目的、手段和结果三方面分析动物医疗应用的道德正当性,提出了动物医疗应用的*边界:人类生存原则、人类基本利益优先原则、人类有限发展原则.在此基础上,提出动物医疗应用的*实践方案:以3R原则(替代、减少、优化)为基本思路,对医疗实验中的动物利用提出尊重、审慎、仁慈、感恩的*要求,对医药生产中的动物利用提出弘扬生态诚信、重视人类对物种的义务等*要求.*审查是落实动物医疗应用*要求的基本路径,本文介绍了动物医疗应用中*审查的现状与目的、类别与程序、主要内容与基本原则、结果传达与跟踪管理等内容.*审查作为一项程序性原则,是对动物医疗应用行为规范化和制度化的*监管,是完善动物医疗应用*实践的重要内容,为解决当前医疗领域动物利用的*困境提供了更为具体的*解决方案.

第三篇动物医学论文范文模板:高分辨率熔解曲线(HRM)技术在动物病毒基因分型中的研究及应用

高分辨率熔解曲线(High resolution melting, HRM)分析技术作为一种新的分子诊断方法在人医医学领域应用较广泛,而在兽医分子诊断领域,尤其在动物病毒基因分型与检测方面国内外研究较少.因此,本研究目的是比较HRM不同分析方法在动物病毒基因分型中的特点,建立常见重要动物疫病快速诊断PCR-HRM方法,为该项技术在兽医临床上的应用提供参考依据.本研究选取三种DNA病毒如,犬细小病毒(Canine Parvovirus, CPV)、番鸭(Muscovy Duck Parvovirus, MDPV)和鹅细小病毒(Goose Parvovirus, GPV),两种RNA病毒,猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus, C*V)和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus, PRRSV)和一种逆转录病毒,禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus, ALV)作为研究对象,并针对各类型病毒特点采取不同的HRM分析方法.

为了区分CPV-2不同基因型,在CPVVP2基因426氨基酸位点和第87氨基酸位点分别设计引物CPV-426F/R和引物CPV-87F/R,建立了区分CPV-2不同基因型的PCR-HRM分析方法,并从30份临床样品中成功检测出19份CPV-2a(GCP>,98%)、8份CPV-2b(GCP>,90%)、2份CPV-2c (GCP>,98%)样品和1份混合感染样品(CPV-2a/2b),根据MDPV和GPVVP3基因序列差异设计出一对简并引物M*-P1/P2,建立了区分MDPV和GPV的PCR-HRM分析方法.从12份临床样品中检测出2份MDPV阳性样品(GCP>,95%)、2份GPV阳性样品(GCP>,95%)、1份VP3基因重组样品和7份MDPV/GPV混合感染样品;根据猪瘟野毒株与疫苗毒株3',UTR区12个碱基的差异,设计出一对特异性引物C*V-F3/F4进行PCR-HRM分析.临床样品检测结果表明12份临床样品均为C*V野毒株,未检测到疫苗毒株,并建立了以C*V野毒株临床样品GCP-3SD值(45-100%)作为区分C*V野毒株和疫苗毒株判别标准的PCR-HRM分析方法;利用PRRSVNsp3序列差异建立了区分H-PRRSV和C-PRRSV的UP-HRM方法.从21份临床样品*检测出4份C-PRRSV阳性样品(探针峰Tm为65.1±,0.28℃),17份H-PRRSV阳性样品(探针峰Tm为75.3±,0.37℃).并根据JXA1-R疫苗毒株特异SNP位点,从17份H-PRRSV阳性样品中鉴定出3份疑似JXA1-R疫苗毒株样品;根据禽白血病病毒GP85基因序列筛选出一对ALV-J亚型特异引物H5/H7b和一对ALV-A/B/C/D//E/K亚型通用引物Gp85U3/Gp85L3,利用片段扩增方法建立了区分禽白血病病毒不同亚型PCR-HRM方法,并从476临床样品中鉴定出82份ALV-K亚型和15份ALV-J亚型样品.由于ALV-E亚型(ev位点)病毒在长期进化过程中已整合进鸡的基因组,ALV-E亚型(ev位点)具有独有的熔解曲线特点,容易从其它外源型ALV病毒中区分出来.因此,该方法可用于禽白血病净化工作中.

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本研究建立了六种常见动物病毒PCR-HRM检测方法,并系统比较了PCR-HRM不同分析方法在动物病毒基因分型中的异同,为动物传染病分子诊断提供一种快速、简单、成本低廉的PCR-HRM检测方法.

第四篇动物医学论文范例:黄芩苷对小鼠金*葡萄球菌性乳腺炎的作用及机制研究

奶牛乳腺炎多发生于产后泌乳期,是危害奶牛养殖业发展的重要疾病之一.全世界目前约有2.2亿头奶牛,其中约1/3奶牛患有不同类型的乳腺炎,每年因此病造成高达400多亿美元的经济损失.根据临床表现可分为临床型奶牛乳腺炎和隐性奶牛乳腺炎.致病菌感染引发的奶牛乳腺炎最为常见,其发病率占总发病情况的90%以上.目前对于该病的研究虽然已经取得了诸多成果,但还无法做到完全解决生产实践中该病引发的诸多问题.全面而深入的认识和研究奶牛乳腺炎有助于奶牛养殖业的发展和消费者的食品安全.

金葡菌是诱发奶牛乳腺炎的最常见、最重要的病原.大量的研究表明其既可以引起隐性乳腺炎,也可以引发临床型乳腺炎,是奶牛产后乳腺炎的主要致病菌.金*葡萄球菌性乳腺炎不仅使奶牛泌乳量下降,使用年限缩短,还会影响乳品质量,引发食品卫生安全问题,危害消费者的健康.如何有效地防治奶牛金*葡萄球菌性乳腺炎已成为兽医工作首要任务之一.

报道的金*葡萄球菌性乳腺炎的治疗方法较多,但抗生素是主要被世界各国广泛用于该病治疗的药物.这些抗生素的使用一定程度上治愈奶牛金葡菌性乳腺炎,产前给予药物治疗一定程度上还可以有效的预防该病的发生情况.但也带来的严重的危害,导致细菌耐药性及乳中药物残留,存在严重的食品安全问题.中药针对乳腺炎的主要发病机制,通过活血化瘀改善*局部血液循环,清热解毒清除病原微生物,补气益血调节机体免疫力,达到治愈本病目的.在临床实践中有很好疗效,成为目前奶牛乳腺炎防治的热点研究方向.研制出使用方便、疗效好的中药方剂,不仅对临床治疗奶牛*炎有积极的意义,而且有很好的市场开发应用前景.

黄芩苷(Baicalin)是提取自中药黄芩根部的有效活性成分.国内外对该药物的研究均十分重视.现代医学的大量研究表明黄芩苷具有抗炎、抑菌、抗变态、解痉及利尿等药物作用.临床应用该药物于传染性肝炎、急性胆道感染、铅中毒等多种疾病的治疗.黄芩苷除被广泛的应用于医学临床外,还被适用在化妆品.研究显示黄芩苷可以吸收紫外线、清除机体的氧自由基,同时降低黑色素,被作为原料应用于功能性美容化妆品的制作.对于黄芩苷作用及作用机制研究可以促进该药物的进一步应用及其在动物疾病治疗方面的应用.

中药大多具有多种生物学效应,因此本研究从多个角度分析研究黄芩苷的药理作用.由于直接利用牛进行研究耗费过多且不符合实验机制研究需求.本研究首先乳导管灌注金葡菌,建立金葡菌性乳腺炎小鼠动物模型.通过在体实验研究黄芩苷的抗炎作用、对乳腺组织的保护作用、在乳腺组织的抑菌作用.实验结果显示,黄芩苷可以有效的降低金葡菌感染乳腺组织的炎症反应和保护乳腺组织,同时增强乳腺组织中性粒细胞对金葡菌的杀灭作用.众所周知乳腺细胞是乳腺组织最重要的细胞,为进一步确证实验结果,本研究分离培养乳腺细胞,给予金葡菌刺激后添加黄芩苷,结果与在体动物实验结果相一致.

为进一步分析黄芩苷在乳腺组织以上药理作用的调节机制,本研究深入对相关的调节信号蛋白进行研究.TLR2是识别金葡菌的主要病原分子模式识别受体,其还可调节下游的信号通路.结果表明在炎症发生后,黄芩苷显著抑制TLR2的表达,降低了该蛋白对下游相关信号的激活.对下游NF-κB和MAPK炎症信号通路研究显示,黄芩苷抑制TLR2表达的同时,还通过抑制NF-κB蛋白及p38蛋白磷酸化减少相应的核转移因子入核,继而抑制IL-1β, TNF-α及IL-6等细胞因子的表达.

金葡菌感染除发炎症外,还可导致凋亡相关因子诱导细胞死亡,从而造成组织结构不完整形成损伤.TLR2受体在金葡菌感染后除可调节验证信号通路外,还可对凋亡相关蛋白进行调节.本研究对乳腺组织进行TUNEL染色及乳腺细胞LIVE/DEAD检测观察发现,黄芩苷可以有效地减少因金葡菌引发的细胞死亡.深入对相关因子研究发现黄芩苷有效地抑制p53蛋白磷酸化、提高BCL-2/BAX的值,进而显著地抑制CASP-3裂解启动细胞死亡程序,很好地保护了细胞.

本研究还探寻黄芩苷的抑菌机制,分离培养中性粒细胞发现黄芩苷不仅在组织层面表现出抑菌作用,在细胞层面也表现出相应的效果.但研究过程中加入的黄芩苷剂量未达到有效抑菌浓度,推测其调节细胞内的相关杀菌物质增强其杀菌作用.通过物理光谱学分析,证实黄芩苷可与中性粒细胞溶菌酶有效结合,进一步通过体外抑菌试验证实,黄芩苷可增强溶菌酶对金葡菌的杀灭作用.

综上所述,本研究通过动物模型观测黄芩苷对金葡菌性乳腺炎的疗效,并深入分析其在乳腺发挥抗炎作用、保护细胞和抑菌作用的机理.同时应用于奶牛临床初步确定其对奶牛的治疗效果.希望本研究结果为黄芩苷在兽医临床应用及金葡菌性奶牛乳腺炎的防治药物的开发提供理论指导及帮助.

第五篇动物医学论文范文格式:双源CT灌注成像早期诊断放射性肺损伤的价值及其病理基础

第一部分双源CT肺部灌注成像及其检测放射性肺损伤的临床意义

目的:针对胸部放疗后的放射性损伤(radiation-induced lung injury, RILI)常规影像形态学改变出现较晚、临床难以早期诊断的问题,胸部功能成像能否比传统影像更早期反映RILI的功能变化?本研究探讨应用双源CT肺部灌注成像(CTperfusion imaging, CTPI)技术的可行性及其早期诊断RILI的临床价值.

方法:选取临床筛查肺动脉栓塞而行4D-CT增强检查但影像诊断结果阴性以及临床最终排除了肺部疾患的患者20例作为对照组,年龄47-76岁(男、女各10例).实验组为48例接受术后放疗的上段食管癌或胸腺肿瘤患者(照射总剂量均为60Gy),年龄43-70岁(男27例,女21例).放疗前及放疗1/2总剂量时间点(30Gy)行CTPI检查,同期检测外周血中肿瘤坏死因子(TNF-α)、转化生长因子(TGF-β1),分析发生RILI(A组)与未发生RILI(B组)患者的血清细胞因子、常规CT表现及CTPI灌注值[相对血流量(rrBF)、相对血容量(rrBV)、相对毛细血管通透性(rrPS)]的变化,采用随机区组设计t检验比较两组间血清细胞因子、CTPI灌注值的差异,采用χ2检验比较常规CT与CTPI对RILI检出的差异.使用西门子新双源CT机(FLASH)肺部4D容积扫描技术作为CTP成像方法,先行常规高分辨率CT平扫(HRCT),后行灌注成像.

结果:⑴对照组所有20例患者均能获得层次丰富、结构清晰的CTP图像,肺野内任意取不同大小的感兴趣区(ROI),均能获得重复性好的灌注值;正常成人肺的rBF、rBV及rPS平均值分别为149.3±,18.3mL/100mL/min、14.86±,2.65mL/100mL、9.54±,2.91mL/100mL/min;肺部各灌注参数及密度值(HU)男女性别、左右部位差异均无统计学意义(P>,0.05);上、下肺野ROI的rBF、rBV值有显著差异(P<,0.05),上中肺野、中下肺野之间的各参数值无明显差异(P>,0.05).⑵48例患者中,18例发生RILl(A组).A组外周血TNF-α和TGF-β1放疗前后的差异无统计学意义(均P>,0.05).放疗1/2总剂量时,A、B两组的外周血TNF-α、TGF-β1组间差异无统计学意义(均P>,0.05);但A组常规CT图像上有2例出现阳性征象.A组受照射肺组织rrBF、rrBV、rrPS均较照射前显著增高(均P<,0.05);B组的rrBF、rrBV较照射前有增高,差异有统计学意义(均P<,0.05),rrPS无明显变化(P>,0.05);照射后A、B两组rrBF、rrBV、rrPS间差异均有统计学意义(均P<,0.05).根据ROC曲线,设rrPs等于1.22为阈值,诊断RILl的敏感度、特异度分别为88.9%、90.0%,优于HRCT的11.1%、90.0%(χ2等于13.61,P<,0.05).⑶对照组与实验组放射治疗前的各对应灌注值之间差异无统计学意义(P>,0.05).

结论:⑴双源CTPI技术能够用于肺组织的灌注成像研究,能定量分析肺组织血流动力学参数(rBF、rBV、rPS等).⑵外周血中TNF-α、TGF-β1变化对早期检测肿瘤放疗患者RILI的价值尚不确定.⑶CTPI能反映放疗后肺组织血液动力学的变化,能早期反映RILI患者照射野的异常灌注,有可能成为早期检出RILI的有效工具.

第二部分放射性肺损伤兔阶梯模型的制备方法及鉴定

一、放射性肺损伤(RILI)兔阶梯模型的制备

目的:针对人类放射性肺损伤(RILI)各期难以在临床上准确把握以及难以进行生化、影像、组织病理等重复性研究,故建立一种适合动态观测与研究的动物模型非常必要.本研究旨在探讨放射性肺损伤(RILI)兔阶梯模型的制备方法.

方法:健康新西兰大白兔54只,随机分作A组、B组及C组,每组各18只.三组均由同一麻醉师使用同样的混合法麻醉技术,即先肌注地西泮(用量为0.8~1.0mL/kg),后肌注速眠新II号(用量为0.4~0.5mL/kg),然后经自制中型动物医学成像扫描床固定后作高能X线单侧全肺单次照射,照射剂量分别35Gy、25Gy及15Gy,分别于照射后第1、2、3、4、5、6、8、12、16、20、24周进行阶梯性常规CT观察.重点观察混合麻醉法的安全及有效性,以及比较各模型组出现CT阳性表现的时间及各组模型的总死亡率.

结果:⑴三组模型麻醉效果显著,无意识的麻醉时间平均为30-40分钟,麻醉死亡率均为零.⑵A、B、C三组模型常规CT出现渗出性毛玻璃影的高峰时间点分别为2周、4周、16周,并均在随后的阶梯时间点得到进一步的证实,即RILI的产生;模型中途死亡数分别为4只、1只、1只,死亡率分别为22.2%、5.6%、5.6%.

结论:混合法麻醉技术具有安全性高、重复性好、可控性强、易于操作等优点.B组(25Gy)具有成模时间适中、死亡率低、阶梯匀称等优势,利于进一步的RILI阶梯性分析,是首选的造模方法.

二、放射性肺损伤阶梯模型的鉴定

目的:临床上放射性肺损伤(RILI)的发生、发展的演变过程较为复杂,RILI的各期无明显分界,因此对RILI动物模型的动态观测及鉴定具有重要的临床指导意义.故本研究旨在探讨RILI兔阶梯模型的动态血清学及组织病理学鉴定,以确定阶梯模型的发生及演变过程.

方法:麻醉方法同上,采用上述25Gy造模方法,共计60只健康新西兰大白兔经高能X线单侧全肺单次照射造模,设为实验组.同时随机同批次大白兔36只作假照射,设为为对照组,按下述照射后时间点分12个亚组,实验及对照组的每个亚组分别为5只、3只.分别于照射后第1、6、12、24、48、72小时及第1、2、4、8、16、24周进行开胸暴露心脏后穿刺提取4-8mL全血以备血清学检测,随后处死模型分别取两肺中带上、中、下野6处标本,分别进行HE染色光镜、电镜和局部肺组织TNF-a、TGF-β1的检测.实验组各时间点若有模型死亡,及时添加新个体进行补充.

结果:⑴实验组两只分别于照射后第2、8周死亡,实验周期内总死亡率3.3%.⑵实验组所有兔受照射肺均产生了RILI,早期以急性炎症反应为主,晚期以进行性肺纤维化为特征.⑶实验组受照射1小时后局部肺组织TNF-α表达、48小时后TGF-β1表达与对照组差异有统计学意义(P值均<0.05).⑷光镜下,实验组受照射1小时后肺泡壁厚度、肺间质面积密度、24小时后间质内纤维母细胞和纤维细胞数量与对照组差异均有统计学意义(P值均<0.05),并分别与照射后的时间直线相关(r等于0.82086、0.87181、0.68230,P值均<,0.05).⑸电镜下,实验组各时间点之间胶原纤维相对含量差异有统计学意义(F等于100.31,P等于0.000),对照组各时间点之间的差异无统计学意义(F等于1.00,P等于0.450).实验组受照射48小时后肺内胶原纤维相对含量与对照组差异有统计学意义(P值均<0.05),并与照射后时间直线相关(r等于0.99318,P等于0.0000).


https://www.mbalunwen.net/kejidaquan/79728.html

结论:RILI兔阶梯模型具有良好的可靠性、稳定性以及RILI发生发展的阶梯性,较好地模拟了RILI的发生、发展的演变过程.细胞因子等对RILI的诊断有一定的参考意义,但不能作为诊断或预测的依据.

第三部分放射性肺损伤兔阶梯模型功能成像技术研究

目的:探讨健康新西兰大白兔的CT灌注成像(CTPI)技术参数及其定量分析的可行性.

方法:健康新西兰大白兔36只假照射组(雌雄各18只),均由同一麻醉师使用同样的混合法麻醉技术,即先肌注地西泮(用量为0.8~1.0mL/kg),后肌注速眠新II号(用量为0.4~0.5mL/kg),然后经自制中型动物医学成像扫描床固定后,分别于假照射后照射后第1、6、12、24、48、72小时及第1、2、4、8、16、24周进行阶梯性常规CT扫描及CT灌注成像(CTPI).CTPI使用设备为西门子新双源CT机(FLASH),采用全肺4D容积动态扫描技术.扫描参数:管电压100kv,管电流自动调节;4D1.5s模式;非离子对比剂规格为300mg I/mL,总量5mL,注射流速0.8mL/s.CTPI时采用专用动物呼吸机进行呼吸暂停15s.

结果:36只大白兔均能获得层次丰富、结构清晰的CTPI图像,肺野内任意取不同大小的感兴趣区(ROI),均能获得重复性好的灌注值;正常兔肺的rBF、rBV及rPS平均值分别为123.8±,25.9mL/100mL/min、13.04±,2.07mL/100mL、8.97±,2.14mL/100mL/min;肺部各灌注参数及密度值(HU)在雌雄性别、左右部位等方面的差异无明显统计学意义(P>,0.05);上、下肺野ROI的rBF、rBV值的差异有显著统计学意义(P<,0.05).假照射后不同时间点的各对应灌注值重复性佳,各时间点CTPI参数差异无明显统计学意义(P>,0.05).

结论:正常兔全肺CTPI各参数值能够进行定量测量与分析,且重复性好,与人类全肺具有相似的变化规律.

第四部分双源CT灌注成像早期诊断放射性肺损伤的实验研究

目的:利用全肺双源CT灌注成像(CTPI)技术研究放射性肺损伤(RILI)兔阶梯模型的血流动力学变化规律,探索其发病进程中的病理基础及其早期诊断RILI的价值.

方法:健康新西兰大白兔72只,利用随机数字表分为两组:实验组36只行25Gy单侧全肺单次照射,对照组36只为空白对照组,行单侧全肺假照射;两组按照射后1、6、12、24、48、72h和1、2、4、8、16、24周各分为12个亚组.每只兔于照射前和照射后所处亚组时间点做常规CT和CTPI,后取肺组织行光镜、电镜观察,将同期CTPI表现、病理变化及HRCT征象作对照分析.实验组与对照组CTPI参数比较采用t检验,CTPI参数与病理观察值的相关性采用两变量直线相关分析,CTPI与常规CT对RILI检出率比较采用卡方检验.

结果:⑴对照组肺CTPI参数在各时间点上保持在相对稳定的水平.实验组照射后肺实质血流量(rBF)、血容量(rBV)和毛细血管通透性(rPS)在多数时间点上(6、12、72h及1、2、8、16、24周)与照射前差异有显著统计学意义(t等于2.90~6.37,P<0.05),呈“先降—后升—再降”的规律:1~12h先短暂的降低,后快速升高并显著高于对照组,于72h至2周分别达高峰,随后下降,并逐步低于对照组,至24周达最低值.⑵实验组受照射肺病理变化以毛细血管内皮细胞、基底膜和肺泡上皮细胞损伤为主,并随时间呈现一定规律性.实验组照射后肺rBF、rBV与病理改变有显著相关性(r等于0.74、0.83,均有P<0.05),rPS与毛细血管外红细胞数、毛细血管基底膜破坏之间有显著依存关系(r等于0.87、0.88,均有P<0.05).⑶在所有时间点上,CTPI对RILI的检出率均高于HRCT,两者差异有统计学意义(χ2等于4.37,P等于0.036).根据ROC曲线,两者诊断RILI的敏感度、特异度分别达92.3%、90.0%与69.2%、90.0%(Z=13.06,P<,0.05),CTPI的诊断效能明显优于常规CT,尤其是在RILI模型的早期阶段(放疗后的前4周).

结论:CTPI参数初步揭示了RILI过程中的血流动力学演变规律,并间接反映以肺毛细血管通透性为主要变化的病理生理状态;RILI的CTPI异常在时间上先于常规CT,有望成为早期检测与早期诊断RILI的有力手段.

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