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2019年康定市家禽主要疫病免疫抗体水平检测与分析

主题:疫病 下载地址:论文doc下载 原创作者:原创作者未知 评分:9.0分 更新时间: 2024-03-08

简介:本文是关于抗体类论文范本跟疫病方面论文如何写.

抗体论文范文

摘 要:以2019年春防后的鸡作为检测对象,运用血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验检测康定市某3家养殖场和某2家交易市场的样本中H5亚型禽流感及新城疫抗体水平.5个采样点各采集12个样本,共采样60个.结果表明,该5个采样点的H5亚型禽流感及新城疫抗体离散度较高,但是抗体水平合格率均达到国家标准.

关键词:禽流感;新城疫;抗体;康定市

中图分类号:S858.31文献标识码:A文章编号:1007-273X(2020)05-0011-02

H5亚型禽流感是影响世界各地家禽的主要疫病,世界卫生组织(OIE)将其列为依法通报的动物疫病,同时也是我国的一类动物疫病, H5亚型禽流感是我国强制免疫和监测的疫病[1].新城疫也是我国的一类动物疫病,由于感染的鸡群在呼吸系统、消化系统和神经系统等都能引起强烈病变,也称为“鸡瘟”,不同季节、不同品种和不同日龄的鸡都易感[2].为了调查四川省康定市家禽对H5亚型禽流感、新城疫的抵抗能力,在2019年春防后,选择了家禽相对集中的3家养殖场和2家交易市场进行随机抽样调查.评价家禽的疫病抵抗能力,为进一步的疾病防控工作提供科学依据.

1 材料与方法

1.1 试剂

禽流感病毒H5亚型血凝抑制试验抗原(哈尔滨维科生物有限公司,生产批号:2018008).鸡新城疫血凝抑制试验抗原(青岛立见诊断技术发展中心,生产批号:010131801).禽流感病毒H5亚型阳性血清(哈尔滨维科生物有限公司,生产批号:2016003).鸡新城疫血凝抑制试验阳性血清(青岛立见诊断技术发展中心,生产批号:010151802).SPF鸡阴性血清(青岛立见诊断技术发展中心,生产批号:20180301).

自配1%鸡红细胞悬液:由于不同个体的鸡红细胞对病毒敏感性存在差异,所以共采取3羽健康成年公鸡的血液,重复制作3个1%鸡红细胞悬液,将3个悬液混合后4 ℃保存备用[3].

1.2 器材

SC-04型低速离心机,安徽中科中佳科学有限公司;DHP-9162型电热恒温培养箱,上海一恒科技有限公司;2W-H型振荡器,常州澳华仪器有限公司;DY20659型加样器(5~50 uL),大龙兴创实验仪器有限公司;一次性96孔V型(110°)反应板.

1.3 样本采集

1.3.1 血液样本采集 在采血前准备采血工具,包括酒精棉球、干棉球、一次性5 mL真空采血管、针头、记号笔、标签、装有冰袋的泡沫箱.通过鸡翅下静脉采血,共采集5组样品.A、B、C组样本采集于康定市某3家养殖场,每组各12羽;D、E组样本采集于康定市某2家活禽交易市场,每组各12羽,样本共计60个.

1.3.2 血清试样制备 将采集的血液样本斜面静置12 h,待血清析出.将析出的血清缓缓注入新的1 mL灭菌离心管中,注意不要注入凝血块.血清颜色呈浅、半透明较好,用记号笔做好标记备检[4].

1.4 抗体检测方法及试验步骤

1.4.1 抗体检测方法 禽流感抗体检测依据中华人民共和国出入境检验检疫行业标准(SN/T 1182—2010 禽流感检疫技术规范)进行血凝试验与血凝抑制试验[5].新城疫抗体检测依据中华人民共和国出入境检验检疫行业标准(SN/T 0764—2011 新城疫检疫技术规范)进行血凝试验和血凝抑制试验[6].

1.4.2 试验步骤

(1)血凝试验(HA)测定抗原的血凝价.在微量反应板的1~12孔各加入25 μL生理盐水;换滴头,吸取25 μL的抗原加入到第1孔,然后倍比稀释至11孔,并弃去剩下的25 μL;换滴头,每孔再加入25 μL的生理盐水,混匀后,每孔加入25 μL的1%鸡红细胞悬液;振荡混匀,室温静置30 min后观察结果.HA试验的判定方法:将板倾斜,观察红细胞有无呈泪滴状流淌.完全血凝(不流淌)的抗原最高稀释倍数代表一个血凝单位(HAU).测得禽流感病毒H5亚型血凝抑制试验抗原的血凝价为7log2;鸡新城疫血凝抑制试验抗原的血凝价为8log2.

(2)血凝抑制试验(HI)测定血清中的抗体滴度.根据HA试验配制4HAU抗原,H5亚型血凝抑制试验抗原进行1∶2稀释配制[5];鸡新城疫血凝抑制试验抗原进行1∶2稀释配制[6].

在微量反应板上的第1~11孔各加入25 μL生理盐水,第12孔加50 μL生理盐水;吸取25 μL待检血清加入到第1孔内,充分混匀后倍比稀释至第10孔;在第1孔至11孔加入25 μL的4HAU,室温静置30 min;然后每孔加入25 μL的1%鸡红细胞悬液,振荡混匀,室温静置30 min后觀察结果.以完全抑制4HAU抗原的血清最高稀释倍数作为HI滴度.阴性对照孔血清滴度不大于2log2,阳性对照孔血清误差不超过1log2,试验有效.

2 结果与分析

抗体合格标准:禽流感抗体水平≥4log2;新城疫抗体水平≥5log2[7].

由表1可知,该地H5亚型禽流感抗体水平为(5~10)log2,抗体水平合格率为100%(禽流感抗体水平≥4log2),达到国家标准(合格率≥70%).各采样点的抗体水平标准差为(1.1~1.6)log2,平均(6.8~7.4)log2,CV值15.6%~21.1%,抗体离散度较高[8].

由表2可知,该地新城疫抗体水平为(5~10)log2,抗体水平合格率为100%(新城疫抗体水平≥5log2),达到国家标准(合格率≥70%).各采样点的抗体水平标准差为(1.1~1.5)log2,平均(7.0~7.8)log2,CV值15.6%~21.1%,抗体离散度较高.

3 小结与讨论

根据试验结果可知,5个采样点的H5亚型禽流感、新城疫抗体水平离散度较高,但是抗体水平合格率均达到国家了标准,表明康定市家禽对H5亚型禽流感、新城疫有一定的抵抗力,但是抗体水平较低的鸡感染疫病几率较大.通过调查发现,康定市海拔较高、光照充足,在一定程度上限制了疫病的发生.由于地貌气候复杂多样,康定市家禽养殖业还处于以农户散养为主,大多养殖户未形成科学的饲养管理理念.本次调查中,大多数养殖户不愿配合样品的采集,给调查带来了困难,导致试验样本不充分,只能在一定程度上反映康定市家禽对H5亚型禽流感、新城疫的抗病能力.

参考文献:

[1] 钱昌银,程晓峰,刘 华,等.2017年安徽省合肥市禽流感抗体检测[J].中国动物检疫,2018,35(12):26-28.

[2] 张勃伟,王俊全,杨永倩,等.渭南市某海兰褐蛋鸡场蛋鸡新城疫抗体水平的检测及分析[J].陕西农业科学,2018,64(11):45-48.

[3] 李 丽.血凝和血凝抑制试验中制备红细胞悬液的几点体会[J].甘肃畜牧兽医,2015(6):25-28.

[4] 张万林.浅谈鸡血清采集存在问题及对策[J].中国畜牧种禽业,2016(11):130-131.

[5] SN/T 1182—2010,禽流感检疫技术规范[S].

[6] SN/T 0764—2011,新城疫检疫技术规范[S].

[7]王娟娟.2014年柳城县畜禽主要疫病免疫抗体水平监测及分析[D].南宁:广西大学,2016.

[8] 郑艺杰.龙海市鸡新城疫免疫抗体水平调查[J].中国畜禽种业,2017(8):5-6.

总结:综上所述,本文论述了关于疫病方面的相关大学硕士和抗体本科毕业论文以及相关抗体论文开题报告范文和职称论文写作参考文献资料.

疫病引用文献:

[1] 抗体和中和抗体研究生毕业论文范文 抗体和中和抗体类有关本科论文怎么写2000字
[2] 抗体大学毕业论文范文 关于抗体毕业论文提纲范文2500字
[3] 抗体和小宇宙毕业论文模板范文 关于抗体和小宇宙论文如何写2500字
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