简介:关于抗体疫苗方面的论文题目、论文提纲、抗体疫苗论文开题报告、文献综述、参考文献的相关大学硕士和本科毕业论文。
【摘 要】 目的 证实FCMS增强O-Asia I型FMDV疫苗免疫功能的有效性,选择FCMS使用的有效浓度及诱导抗体的维持时问.方法 本文用ELISA法测定J,免疫后3、6、14周0型FMDV VPI及Asia l型F&,acute,MDV抗体的滴度.结果与结论 与疫苗纠【和阳性组对照,1oo Ug ECMS诱导O-Asia I型FMDV疫苗产生两种抗体的效价较高,维持时间较长.相对来讲,ECMS诱导0型FMDV疫苗的抗体含量较高,但下降较快；诱导Asia I型FMDV疫苗的抗体较低,但下降非常缓慢.100 Ug ECMS的效果优于公认的皂树皂甙(QA)佐剂.
口蹄疫（Foot and Mouth Disease,FMD）是重大的人畜共患病,目前预防该病的主要方法足疫苗免疫.然而机体免疫后产生的抗体比例只有20%~30%,保护作用并不显著1J.为增加疫苗的免疫作用,人们在疫苗中加入中药提取成分作为佐剂,以提高抗体水平.将木鳖子提取物( Extract of CochinchinaMomordica Seeds,FCMS)作为免疫佐剂已有多篇报道[2.3].本文用ELISA技术,测定丫O- Asial型FMD疫苗加入ECMS免疫后的豚鼠血清IgG,通过研究不同浓度ECMS在免疫不同时期豚鼠血清IgG含量,探讨FCMS的免疫功能增强作用,及其最佳浓度及免疫持续时间.l 材料和方法1.1材料1.1.1 实验动物：DHP豚鼠由浙江大学实验动物中心生产提供(实验动物生产许可证SCXK浙2007_0030).1.1.2 试剂：0- Asial型FMD双价疫苗为内蒙古生物药品厂产品；F,CMS为浙江大学动物科学学院制备及提供；皂树皂甙( QA)为丹麦NOR-V Err公司产品；FMDV VP I结构蛋白抗体ELISA检测试剂盒为上海优耐特生物医药有限公司产品；Asia I FMDV抗体E I_,ISA检测试剂盒为中国农科院兰州兽医研究所产品；羊抗豚鼠lgC和HRP标记兔抗羊JgG-F抗体为美国BeTHVl公司产品.1.2方法1 .2.1 疫苗最适免疫剂量的选择：按文献4报道,F-MD疫苗剂量选择0.5 mL/只.1.2.2 免疫接种：取DHP品系豚鼠35只（体重约300 g,雄性）,分成7组,每组5只.第1.4组为疫苗+ 2500Ug、500Ug、100 Ug及20Ug ECMS佐剂组；第5组为疫苗+ 100『上g QA佐剂组,作阳性对照；第6、第7组为疫苗免疫组和非免疫组.每只豚鼠疫苗用量0.5 mL,免疫f前加入相应佐剂混匀,施行臀部肌肉注射,问隔3周再作第2次免疫一1.2.3 采样及样品处理：第2次免疫后3、6、l4 周时从心赃采I血,分离血清,- 40℃保存备用．1.2.4 血}菏抗0犁FMDV VP1结构蛋白抗体测定：按试剂盒产品说明1},用问接ELISA检测法,测定豚鼠免疫后3、6 .14周血清抗FMDV VPI结构蛋白抗体的效价.
正式测定前,将被测【血清按1：200、1：400、1：600、~800、1：1000的比例,用生理盐水稀释并测定抗体.结果稀释度直至1：800时,血清显色仍明显,故选定此稀释度为正式测定的血清稀释度1 .2.5 血清抗Asia f型FMDV抗体测定：参照试剂盒产品说明书及文献5,用间接双抗夹心ELISA检测法,测定豚鼠免疫后3、6、14周血清抗Asia l型FMDV抗体的效价 血清样本稀释度的选取同上.1 .2.6统计分析：数据经Microsoft Excel处理,用x±S表示. 用t检验法检测组间的统计学差异,显示性水平设为a等于 0.05.2结果2.1 抗O型FMDV VP1结构蛋白血清抗体持续效价
不同浓度ECMS辅助0型FMDV疫苗,持续产生VPI抗体的结果见表1.
从表中可见,免疫后3周时,所仃加佐剂组诱导的0型F&,acute,MDV VI)I结构蛋白抗体水平均高于小加佐剂的疫苗组,但只有500、100 u.g ECMS组呈显著增加(P<,0.01).6周时,除20Ug ECMS组外,其余加佐剂的疫苗组均高于疫苗组,但只有2500 .100Ug ECMS组呈显著增加(P<,0.01),14周时,100 Ug ECMS组及QA组高于疫苗组,但只有100fUg QA组呈显著增加(,)<,0.01).随着时间推移,所有加佐剂组抗体水平均从高到低变化.100 Ug ECMS组抗体高于或等于阳性QA组2.2抗Asia I型FMDV血清抗体持续效价
不同浓度ECMS辅助Asia型EMDV疫苗,持续产生IgG抗体的结果见表2 从表中可见,免疫后3、6、14周,2500、100、20 Ug ECMS组和100Ug QA组诱导的Asia T型FMDV抗体水平高于疫苗组,但只有100 Ug ECVIS组显著大于疫苗组 随着时问推移,各组抗体水甲比较缓慢地下降. 100Ug ECMs组各时间抗体稍高于阳性QA组
3讨论
ECMS是葫芦科植物木鳖成熟种子的提取物,主要用于治疗疮痈肿痛等疾病 近来发现该药在适宜的浓度时,有提高机体免疫J力能的作用.本文以豚鼠为动物模型,研究了不同浓度ECMS,在小同免疫时间对0型及Asia I 型FMD疫苗免疫功能的增强作用.结果表明,ECMS对FMI）疫苗免疫增强作用明显,但可能由于豚鼠个体差异的因素,导致有些较高浓度l/CMS组,在免疫后3~6周内诱导的抗体浓度也无显著增加.与阳性QA组及疫苗组对照,以100 Ug ECMS免疫诱导的抗体滴度较高,维持时问较长,且不同剂量组之问的抗体滴度以正态分布变化.说明ECMS实际使用的最佳剂量是100 Ug,过高或过低的ECMS剂量,效果反而不甚理想.
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另外,对同一剂量ECMS组的各个时间点进行比较,ECMS能在免疫后较短时期内,诱导出较高水平的O型}’MD疫苗抗体,但下降速度较快；而诱导Asia I型FMD疫苗的抗体水平相对较低,但各时段下降速度较慢,甚至延长至6~ 14周时,其抗体相对滴度仍然维持在较高的水平.这种情况提示我们,今后在没计佐剂剂型Il寸必须以此进行参考.
皂树皂甙(QA)是国外公认的免疫佐剂,然而实验发现其剐作用较大3.木鳖子提取物FCMS在恰当的浓度使用时,副作用小,效果又高于皂树皂甙,所以是一种很有开发价值的中药免疫佐剂.
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